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使用高效液相色譜儀時容易忽略的五個細節液相色譜如何操作
發表時間:2021-03-03 1:14:48

高效液相色譜儀作為實驗室常用的分析型儀器,上手比較快,但有五個操作細節容易被忽略。即使是經驗豐富的老分析員也會犯錯誤,導致一些儀器故障。 
1、高效液相色譜儀流動相不過濾
因為塵埃或其它雜質會磨損柱塞、密封圈和單向閥,因此流動相預先用0.2um或0.45um濾膜過濾后再使用。流動相的溶劑濾頭要不定期清洗或更換。  
2、高效液相色譜儀使用后沒有及時清洗
流動相中不應含有腐蝕性物質,含有緩沖鹽的不應留在高效液相色譜儀系統內,由于蒸發或漏液,可能造成鹽類晶體析出,會堵塞密封圈和單向閥。
3、高效液相色譜儀流動相走空
泵工作時要防止流動相走空,否則泵空轉也會磨損柱塞桿和密封圈,造成漏液故障。
4、高效液相色譜儀沒有流動相流出,有無壓力
可能是泵內有空氣,需要先排空,或使用注射器針筒抽出液體,還有可能性是密封圈磨損,需更換。
5、高效液相色譜儀壓力和流量不穩
可能是有氣泡,或者是單向閥內有異物,需要卸下單向閥,放在10%甲醇水,或者異丙醇超聲后再使用。
作為高效液相色譜儀的操作人員,一定要認真學習液相的說明書,熟練掌握軟件和硬件的操作,日常的維修,能夠獨立排除最基礎的故障并且維修。這樣才能延長高效液相色譜儀的使用壽命和工作品質。  

通用(深圳)儀器有限公司是一家專門從事液相色譜儀研發,設計,生產與銷售的技術企業,具有強大的研發及工程技術實力。產品有液相色譜、離子色譜儀、原子熒光光譜儀、血藥濃度分析儀,液相色譜的相關單元部件。想了解更多儀器設備,歡迎咨詢

液相色譜柱日常使用和維護

  色譜柱的正確使用和維護十分重要,稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護色譜柱。

  ①避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,因此在調節流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩(如前所述)。

  ②應逐漸改變溶劑的組成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變為全部是水,反之亦然。

  ③一般說來色譜柱不能反沖,只有生產者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。

  ④選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質被溶解。

  ⑤避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。

  ⑥經常用強溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內的雜質。在進行清洗時,對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規分析需要50~75ml。

  ⑦保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過晚上或更長時間。

  ⑧色譜柱使用過程中,如果壓力升高,一種可能是燒結濾片被堵塞,這時應更換濾片或將其取出進行清洗;另一種可能是大分子進入柱內,使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現塌陷,死體積增大。

  在后兩種情況發生時,小心擰開柱接頭,用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內填料整平。然后用適當溶劑濕潤的固定相(與柱內相同)填滿色譜柱,壓平,再擰緊柱接頭。這樣處理后柱效能得到改善,但是很難恢復到新柱的水平。

  柱子失效通常是柱端部分,在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),可以起到保護、延長柱壽命的作用。采用保護柱會損失一定的柱效,這是值得的。

  通常色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上。以硅膠為基質的填料,只能在pH2~9范圍內使用。柱子使用一段時間后,可能有一些吸附作用強的物質保留于柱頂,特別是一些有色物質更易看清被吸著在柱頂的填料上。新的色譜柱在使用一段時間后柱頂填料可能塌陷,使柱效下降,這時也可補加填料使柱效恢復。

  每次工作完后,最好用洗脫能力強的洗脫液沖洗,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。當采用鹽緩沖溶液作流動相時,使用完后應用無鹽流動相沖洗。含鹵族元素(氟、氯、溴)的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道,不宜長期與之接觸。裝在HPLC儀上柱子如不經常使用,應每隔4~5天開機沖洗15分鐘。

液相色譜柱 液相色譜柱 液相色譜柱日常使用和維護_液相色譜柱   液相色譜作為工業生產和實驗研究過程中,運用較多的一種分析檢測設備,其色譜柱柱效高低會對樣品分析結果造成較大影響。因而如何提高液相色譜柱柱是實際工作運行過程中,不可避免的一大難題。在了解如何進行液相色譜柱柱效提高之前,對柱效值進行測算是需要了解的一大內容。   液相色譜柱柱效值并不足以大部分預測其色譜柱性能,一般色譜柱性能是指色譜柱用于分離樣品的能力大小。而高柱效并不意味著能保證這種分離樣品能力。以下根據網上資料,對如何提高液相色譜柱柱效進行如下簡述:   1.通過降低液相色譜中移動相的流速,從而實現提高柱效,但此方法會導致延長設備的分析時長。
   2.通過減少液相色譜柱中的固定相的量,從而減小色譜柱中樣品的負載量。
   3.減小液相色譜中固定相的顆粒度,但應注意減小顆粒度情況,避免因顆粒度過小導致降低色譜柱的滲透率。
   4.在選擇液相色譜柱中的移動相時,一般建議選用低粘度的移動相,從而加快傳質。但需要注意的是,低粘度移動相并不適用于多組份樣品的分析。
   5.除了選擇低粘度的移動相之外,可以通過適當調節色譜柱的柱溫,從而降低移動相黏度。但與選用低粘度移動相相同,該方法會導致分離度會隨之降低。
   6.對于停滯流動相的體積,一般建議盡量減小,從而達到加快移動相流速的目的,實現提高液相色譜柱柱效的目的。
   由于所得資料有限,因而上述內容并不全面,具體提高液相色譜柱柱效方法應根據實際情況咨詢相關專業技術人員進行操作。